Life Sciences
Testando para SARS-CoV-2
Preparação de amostras para diagnóstico de RT-PCR ambulatorial
O teste de diagnóstico para suspeita de SARS-CoV-2 está em pleno andamento. De acordo com Christian Drosten *, virologista do Hospital Charité em Berlim, o curso moderado da epidemia na Alemanha até o momento se deve a esses testes de laboratório. Muitos laboratórios, portanto, agora precisam de dispositivos confiáveis para a preparação segura de amostras, especialmente na preparação para o teste de RT-PCR.
Três fases de preparação da amostra para o teste RT-PCR para 2019-nCoV
A OMS emitiu diretrizes para os laboratórios que realizam testes. Os resultados de teste seguros para 2019-nCoV após um swab nasal ou orofaríngeo requerem uma limpeza completa da amostra com antecedência.
Com o equipamento de laboratório IKA para o setor de ciências biológicas, as etapas individuais de preparação de amostras podem ser realizadas de forma confiável e rápida. Acima de tudo, os dispositivos IKA podem ser operados por qualquer pessoa - incluindo funcionários que podem precisar ser treinados e familiarizados rapidamente em testes de laboratório de diagnóstico médico como resultado da situação atual. Antes que o teste real para SARS-CoV-2 possa ser realizado, três fases de preparação da amostra são necessárias primeiro.
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Preparação da amostra
Quando as amostras são preparadas, as células da mucosa oral são centrifugadas, isoladas e misturadas para criar suspensões celulares. Aqui, como é o caso em toda a biologia molecular, pipetas com RNAse / Filtros sem DNAse são necessários, uma vez que o RNA é destruído muito rapidamente por enzimas, como a RNAse. O filtro também evita eficazmente a contaminação cruzada. Dependendo do tipo de amostra, pipetas maiores do que as recomendadas pela OMS podem também ser usado. A nova série PETTE da IKA oferece o benefício adicional do design ergonômico. A pipetagem frequente em testes diários é, portanto, uma brisa. Além disso, centrífugas e shakers também são usados.
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Lise
Os envelopes dos vírus são então abertos. Também aqui, pipetagem segura é o ponto principal. Para controle de temperatura, agitadores térmicos de alta qualidade com acessórios de 1,5 ml ou de 2 ml, como o IKA Matrix Orbital Delta F1.5 ou F2.0 , são recomendados.
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Purificação e extração
Para purificação e extração, são necessárias pipetas fixas ou, de preferência, variáveis, já que tamanhos diferentes são recomendados pela OMS (2, 10, 200 e 1000 µl). O material fragmentado é então centrifugado novamente. A centrífuga midi IKA GL , por exemplo, é adequado para os processos de lavagem e separação nesta fase.
O teste propriamente dito só pode ser realizado após essas três fases preparatórias. Para o teste, o RNA do coronavírus que pode estar presente deve primeiro ser reescrito em cDNA e reproduzido em um termociclador para um número detectável de 10 ^ 9. A reprodução ocorre com o auxílio dos chamados “primers” (fragmentos de DNA que correspondem ao RNA do vírus), que, se houver RNA ou cDNA do coronavírus, iniciam o processo de reprodução. Os primers do material genético do coronavírus feito em laboratório são adicionados à amostra para descobrir se o material genético do coronavírus pode se ligar à amostra do paciente (= positivo) ou não (= negativo).
Teste para SARS-CoV-2
Os melhores resultados são obtidos com estes dispositivos:
Thermoshakers
Centrifuges
Dry Block Heaters
Pipettes
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